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細胞貼壁的六問六答-締一生物生物

更新時間:2017-09-14  |  點擊率:1543

1.細胞在體外培養(yǎng)時應(yīng)該貼壁嗎?

 

  答:大部分來自實體組織器官的細胞會貼壁。它們在機體內(nèi)時,也是與其他細胞或者細胞外基質(zhì)結(jié)合的。一般一種細胞具有一種特定的功能,不同種細胞有機組合在一起,就能構(gòu)成協(xié)同完成某些功能的器1。

 

 

 

  2. 細胞貼壁的原理是什么?

 

  答:貼壁的過程可能是這樣的:細胞首先分泌細胞外基質(zhì),這種細胞外基質(zhì)黏附在支持物的表面(如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿的底面)。細胞通過其表面的黏附因子與這些細胞外基質(zhì)結(jié)合。所以細胞貼壁與否與細胞本身分泌細胞外基質(zhì)的能力以及細胞本身表達的黏附分子的數(shù)量有關(guān),也與培養(yǎng)皿壁的表面結(jié)構(gòu)有關(guān)1。培養(yǎng)基中的黏附蛋白也會摻入到細胞外基質(zhì)中。

 

  例如,曾有人用胎牛血清培養(yǎng)大鼠腎臟細胞,發(fā)現(xiàn)大鼠腎臟細胞形成的外基質(zhì)層中,除了有腎臟細胞自身合成的纖黏連蛋白外,也含有胎牛血清中的纖黏連蛋2

 

  又有人培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs),發(fā)現(xiàn)60照射過的塑料培養(yǎng)瓶(照射劑量6Gy)能促進貼壁,其效果和IV型膠原包被的培養(yǎng)瓶相同。這可能與射線改變了培養(yǎng)瓶壁的表面結(jié)構(gòu)有關(guān)3。

 

  圖 細胞貼壁的鏡下照片

 

  3. 貼壁有什么好處嗎?

 

  答:貼壁對維持細胞的良好形態(tài)和促進細胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細胞,發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細胞,其增殖率也較4。人的造血干細胞培養(yǎng),更是需要有貼壁細胞構(gòu)成“造血微環(huán)境”。有人發(fā)現(xiàn)這些貼壁細胞包括成纖維細胞,巨噬細胞,上皮樣細胞,脂肪細胞,它們交錯連接,構(gòu)成網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)5,6

 

  4. 對于某些懸浮細胞,能促進它貼壁嗎?

 

  答:有人介紹過一種使懸浮的肝癌細胞貼壁的方法,即采用多聚賴氨酸浸泡過的蓋玻片,放置到培養(yǎng)瓶中,可使懸浮的肝癌細胞貼7。包被過其他細胞外基質(zhì)的載體表面,也可促進細胞黏附。

 

  5、不同細胞外基質(zhì)對細胞粘附的效果一樣嗎?

 

  答:不會*一樣。具體看是哪種細胞。軟骨細胞對II型膠原的黏附性較好;上皮細胞在Ⅳ型膠原底物上貼壁良好,而在I、II、III型膠原底物的培養(yǎng)板上貼壁情況較差。纖黏連蛋白能夠加速成纖維細胞貼壁,但對表皮細胞、晶狀體上皮細胞和乳腺上皮細胞貼壁則無此作4。

 

  圖 細胞外基質(zhì)

 

  6、牛血清對細胞粘附有作用嗎?

 

  答:有。牛血清中含有玻連蛋白、纖黏連蛋白,對細胞粘附都有促進作8。需注意,熱滅活小牛血清會降低血清對細胞粘附的促進作用,尤其在細胞旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)時更為明9。

 

  參考文獻

 

  1. 劉梅芳、徐國恒。 細胞體外培養(yǎng)時為什么會貼到培養(yǎng)皿壁上。 生物學(xué)通報。2007,42(9):54

 

  2. Hayman EG, Ruoslahti E. Distribution of fetal bovine serum fibronectin and endogenous rat cell fibronectin inextracellular matrix. J Cell Biol. 1979 Oct;83(1):255-9.

 

  3. 吳建波,尹麗慧,等。 不同培養(yǎng)方法對骨髓間充質(zhì)干細胞貼壁 和純度的影響。 山東醫(yī)藥,2008,48(40):15-17

 

  4. 韓巖,等。 基膜黏連蛋白和Ⅳ型膠原對培養(yǎng)許旺細胞貼壁及增殖的作用。 中華顯微外科雜志。 2002 , 25 (3) :194-196

 

  5. 朱壬葆, 等。 人骨髓體外培養(yǎng)中貼壁細胞層的形態(tài)分析。 實驗生物學(xué)報。 1982 (2) :33-43

 

  6. 季紅,劉永,趙林普。 小鼠骨髓細胞體外培養(yǎng)中貼壁細胞層的結(jié)構(gòu)與作用。中國病理生理雜志, 1988 (01)

 

  7. 陳桑,劉希鳳,凌茂英。 介紹一種使懸浮的肝癌細胞貼壁的方法。 大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 1992 (4) :61-62

 

  8. Edward G.Hayman,et al.Vitronectin—A major cell attachment-promoting protein in fetal bovine serum.Experimental Cell Research. 1985,160( 2): 245-258

 

  9. Donald J. Giard. Routine heat inactivation of serum reduces its capacity to promote cell attachment. In Vitro Cellular & Developmental Biology.1987, 23( 10): 691–697

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