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細(xì)胞分裂過程中染色體的不正確分布會(huì)帶來災(zāi)難性的后果

更新時(shí)間:2021-01-14  |  點(diǎn)擊率:1050

日本筑波-染色體形式的DNA是生命的基本組成部分,這已不是什么秘密。細(xì)胞分裂過程中染色體的不正確分布會(huì)帶來災(zāi)難性的后果。不平衡的染色體拷貝或非整倍性是腫瘤的標(biāo)志,并影響包括人類在內(nèi)的所有生物的發(fā)育和存活。

 

細(xì)胞如何傳播遺傳物質(zhì)已經(jīng)使研究人員著迷了幾個(gè)世紀(jì)。在2020年6月發(fā)表于《核酸研究》上的一項(xiàng)研究中,筑波大學(xué)的研究人員在木村敬二副教授的帶領(lǐng)下,確定了一種新的蛋白質(zhì)復(fù)合體NWC,它參與了染色體的分布。

NWC與核仁(一種無膜的核內(nèi)結(jié)構(gòu))相關(guān),并在細(xì)胞分裂過程中重新定位到染色體的外圍。這種蛋白質(zhì)復(fù)合物包含三種不同的蛋白質(zhì):1,WDR43和Cirhin。1通常與核仁相關(guān),而WDR43和Cirhin是WD重復(fù)蛋白。木村副教授說:“這項(xiàng)研究很重要,因?yàn)槠駷橹?,核仁蛋白的有絲分裂功能尚未得到充分表征。”

該團(tuán)隊(duì)使用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)了1在人細(xì)胞中的定位。使用專門的顯微鏡,蛋白質(zhì)的位置可以通過其“發(fā)光”顯示出來。他們發(fā)現(xiàn),1在有絲分裂或核分裂過程中位于染色體的外圍。木村副教授解釋說:“當(dāng)我們檢查1蛋白時(shí),我們意識(shí)到它沒有任何功能性基序。然后,我們探索了它可能與其他蛋白復(fù)合的功能。”

使用先進(jìn)的分子技術(shù),研究團(tuán)隊(duì)確定了NWC復(fù)合物并對(duì)其進(jìn)行了表征。他們檢查了從復(fù)合物中去除單個(gè)蛋白質(zhì)的效果,發(fā)現(xiàn)NWC定位于染色體并在有絲分裂中起作用需要所有三個(gè)組件。減少細(xì)胞中NWC的量會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期進(jìn)程不*,從而導(dǎo)致染色體無法分離,錯(cuò)位,以及準(zhǔn)確的染色體分布所需的蛋白質(zhì)的位置和濃度存在缺陷,包括Aurora B,粘著蛋白復(fù)合物和組蛋白H3磷酸化。

Kimura副教授及其同事提出的結(jié)果表明,NWC通過允許Aurora B在著絲粒處積累(部分通過調(diào)節(jié)組蛋白磷酸化)而在有絲分裂染色體穩(wěn)定性中發(fā)揮特定作用。NWC如何控制著絲粒附近的組蛋白磷酸化仍有待確定。

鑒于正確的染色體傳播對(duì)于生命和疾病的預(yù)防至關(guān)重要,因此這些結(jié)果可能會(huì)成為尋找基因的新焦點(diǎn),這些基因突變后會(huì)導(dǎo)致非整倍性或染色體拷貝失衡。

血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(zhǎng)因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒有必要的。盡管如此,在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行,多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子、氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響,在我們的技術(shù)熱線中常常被提到的就是“是否該對(duì)血清進(jìn)行熱滅活”,下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。

 

血清熱滅活操作步驟

編輯

①選用與血清瓶同規(guī)格的對(duì)照瓶一個(gè)。

②對(duì)照瓶?jī)?nèi)放入與血清等體積的水。

③溫度預(yù)試。

對(duì)照瓶?jī)?nèi)插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(jì)(保證測(cè)試溫度的準(zhǔn)確性),放入水浴箱中,接通電源,調(diào)節(jié)溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。

④血清滅活。

血清瓶與帶溫度計(jì)的對(duì)照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計(jì)所示溫度上升至56℃時(shí), 定時(shí)30分鐘。

⑤大瓶血清滅活后,進(jìn)行分裝。

⑥保存。

分裝后,抽樣做無菌試驗(yàn),-20~-70℃保存。

 
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