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蛋白質(zhì)如何阻止細胞攻擊自己的DNA

更新時間:2021-02-19  |  點擊率:689

病毒通過將其DNA注入宿主細胞來繁殖。一旦進入細胞內(nèi)液,這種異物就會觸發(fā)一種稱為cGAS-STING途徑的防御機制。蛋白質(zhì)環(huán)狀GMP-AMP合酶(cGAS)也存在于液體中,它與入侵的DNA結(jié)合形成一個新分子。反過來,它與另一種稱為干擾素基因刺激物(STING)的蛋白質(zhì)結(jié)合,從而誘導(dǎo)炎癥性免疫反應(yīng)。

 

有時,流體中包含的與cGAS蛋白接觸的物質(zhì)不是來自病毒,而是來自細胞本身,例如在細胞核意外破裂后。發(fā)生這種情況時,不會激活cGAS-STING路徑。EPFL的科學(xué)家證明了細胞如何能夠?qū)ψ陨淼腄NA和病原體的遺傳物質(zhì)做出不同的反應(yīng)-并避免攻擊錯誤的靶標(biāo)。他們的發(fā)現(xiàn)發(fā)表在《科學(xué)》雜志上的一篇論文中,為人體炎癥反應(yīng)中的復(fù)雜過程提供了新的思路。

由安德里亞·阿布拉斯瑟(Andrea Ablasser)教授領(lǐng)導(dǎo)的團隊與Beat Beaterer教授和塞爾曼·薩卡(Selman Sakar)教授實驗室的同事合作,發(fā)現(xiàn)了一種新的洞察力,發(fā)現(xiàn)了一種稱為“自體障礙自動整合因子”(BAF)的小蛋白質(zhì)的關(guān)鍵作用。他們表明,BAF通過與無攻擊性DNA結(jié)合,阻止cGAS蛋白發(fā)揮作用,從而阻止了cGAS-STING途徑的蹤跡。

BAF增強細胞核,將核被膜(或膜)連接到內(nèi)部DNA。實驗表明,當(dāng)這種蛋白質(zhì)從實驗室生長的細胞中去除后,細胞核就會破裂。這種破壞將遺傳物質(zhì)釋放到細胞內(nèi)液中,在那里它與cGAS蛋白接觸并觸發(fā)cGAS-STING途徑-就像它是外源DNA一樣。

有多種方法可以使核破裂,例如通過施加機械壓力。但是,據(jù)該論文的主要作者之一巴蒂斯特·蓋伊(Baptiste Guey)所說,只有一種方法-去除BAF蛋白-會誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。Guey說:“因此,我們可以得出結(jié)論,BAF在防止細胞攻擊其自身DNA方面起著關(guān)鍵作用。”

蛋白質(zhì)的抑制劑作用至關(guān)重要:盡管cGAS-STING途徑有助于機體抵抗感染,但也需要加以控制。該論文的另一位主要作者瑪麗蓮娜·維施紐斯基說:“核仁偶爾會破裂,但細胞能夠修復(fù)損傷。”“如果cGAS每次發(fā)生都與DNA結(jié)合,后果將更加嚴重。”

在Aicardi-Goutières綜合征中可以看到過度活躍的cGAS-STING途徑的危險:這是一種罕見的且通常是致命的遺傳性疾病,可引起過度的炎癥反應(yīng),就像人體細胞不斷受到入侵病原體的攻擊一樣。

還認為BAF在某些類型的腫瘤中起作用。根據(jù)Wischnewski所說,癌細胞中蛋白質(zhì)的高濃度可能與預(yù)后不良有關(guān)。她解釋說:“可能BAF使腫瘤更具抵抗力。”“通過阻止cGAS-STING途徑的激活,它可能使癌細胞逃避人體的免疫系統(tǒng)。”

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來源:生物幫

 

有下列情況者,對血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選:

1.養(yǎng)干細胞時,干細胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。

2.養(yǎng)免疫細胞時,過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。

3.基因敲除相關(guān)的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇極低的內(nèi)毒素(≤1EU/ml),對實驗至關(guān)重要;

4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細胞轉(zhuǎn)染,或者肝細胞、神經(jīng)細胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實驗順利的步。

5.實驗室有些細胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)?;蜷L時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對細胞的毒性影響。

總之,血清中內(nèi)毒素含量過高,更容易導(dǎo)致細胞“亞健康”,造成數(shù)據(jù)不準,或細胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導(dǎo)致試驗中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。

細胞培養(yǎng)學(xué)會均依據(jù)內(nèi)毒素對血清的品質(zhì)進行分級和命名。

內(nèi)毒素含量越低的血清,級別就越高,以胎牛血清為例:

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時,此血清為標(biāo)準級胎牛血清;

目前,由于同一廠家,不同批次的血清,內(nèi)毒素數(shù)值也可能有較大差異,因此很多血清廠家在名稱上已不注明級別。但使用者仍可通過檢測報告,自行甄別挑選。)

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