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干細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展歷程

更新時(shí)間:2022-09-15  |  點(diǎn)擊率:806

1981年Kaufman等人[1]直接從小鼠囊胚的ICM 中成功獲得多潛能的胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)以來,自此之后,人們先后從豬、牛、兔等動(dòng)物體內(nèi),分離得到ES細(xì)胞或類ES細(xì)胞系。

隨后的研究中,Thomsom 等人[2]建立了人類胚胎細(xì)胞系,科學(xué)家們開始關(guān)注于胚胎細(xì)胞的定向誘導(dǎo)分化,希望通過這類研究為治療退行性疾病提供組織、器GUAN移植的原材料。顯然,干細(xì)胞的體外培養(yǎng)是進(jìn)行上述各項(xiàng)研究的前提與基礎(chǔ)。在干細(xì)胞的體外培養(yǎng)方面,培養(yǎng)基是其賴以生存的環(huán)境,哪怕是極微小的變化都會(huì)影響干細(xì)胞的增殖和分化[3]。

在隨后的研究中,科研人員發(fā)現(xiàn),干細(xì)胞具有兩個(gè)特性:自我更新的能力以及多向分化的潛能。在體外培養(yǎng)時(shí),實(shí)驗(yàn)人員需要盡可能利用各種培養(yǎng)條件,維持干細(xì)胞的這兩大特性。因此要求ES細(xì)胞培養(yǎng)基中,除了一般體外培養(yǎng)所用到的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,還應(yīng)添加血清、LIF、β-巰基乙醇,L-谷氨酰胺等成分,隨后有發(fā)展出飼養(yǎng)層培養(yǎng)等方法,各種干細(xì)胞專用培養(yǎng)基、條件培養(yǎng)基也相繼問世[4],豐富了干細(xì)胞培養(yǎng)方法與流程。

但目前市場(chǎng)上,干細(xì)胞培養(yǎng)專用的試劑盒,其中培養(yǎng)基和細(xì)胞因子價(jià)格高昂,使得培養(yǎng)成本大大增加,而且實(shí)際操作過程往往需要配合飼養(yǎng)層來培養(yǎng),周期長(zhǎng),步驟繁瑣,對(duì)實(shí)驗(yàn)者有較高的技術(shù)要求,因此很多實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)干細(xì)胞的效果并不理想。

參考文獻(xiàn):

[1] Evans M J,Kaufman M H.Establishment in culture of plurpotential cells from mouse embryos [J].Nature, 1981,292:154-156.

[2] T homson J A,Itskovits-elder J S,Shapiro S S,et al. Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts[J].Science,1998,282(5391) :1145-1148.

[3] 楊 奇.胚胎干細(xì)胞的分離克隆[J].西北農(nóng)林科技大 學(xué)學(xué)報(bào)( 自然科學(xué)版) ,2001,29(3) :120-124.

[4] 郭志林,王新莊,衛(wèi) 木,等.影響昆明小鼠和 BALB/c 小鼠胚胎干細(xì)胞分離、克隆、傳代的若干因素[J].中 國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào),2006,26(4) :448-450.


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