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細(xì)胞傳代的頻率為多久?

更新時(shí)間:2022-09-29  |  點(diǎn)擊率:1039

貼壁型的細(xì)胞的匯合度約為100%的時(shí)候,需進(jìn)行傳代操作。

當(dāng)細(xì)胞以克隆的形式生長(zhǎng)時(shí),匯合度則達(dá)不到100%。對(duì)于該類(lèi)型的細(xì)胞,達(dá)到或者接近最大密度的時(shí)候,即觀察不到細(xì)胞明顯擴(kuò)增時(shí),就需要進(jìn)行傳代。

接觸抑制型細(xì)胞需要在細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)之前傳代,避免產(chǎn)生細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)后接觸抑制后產(chǎn)生性狀的改變。

懸浮型的細(xì)胞必須在細(xì)胞達(dá)到最大飽和密度之前傳代,懸浮細(xì)胞傳代時(shí)只需稀釋至合適的密度,讓細(xì)胞有充足的營(yíng)養(yǎng)恢復(fù)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。

如何處理腫瘤細(xì)胞株?

了解每株細(xì)胞可能產(chǎn)生的生物危害是很難的。

  • 強(qiáng)烈推薦,所有的人類(lèi)和其他靈長(zhǎng)類(lèi)生物的細(xì)胞在預(yù)防HIV和肝炎病毒的實(shí)驗(yàn)條件下操作;

  • 所有的操作必須在生物安全柜中操作,遵守生物安全柜使用規(guī)范;

  • 操作過(guò)程中產(chǎn)生的廢液和廢儀器都要經(jīng)過(guò)清洗、酸處理等處理后才能丟棄。

WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求:

1、牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國(guó)家,并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。

2、有些國(guó)家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。

3、證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。

4、血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌,保證無(wú)菌。

5、無(wú)細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國(guó)家要求無(wú)細(xì)菌噬菌體污染。

6、對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。

我國(guó)對(duì)牛血清的質(zhì)量中提出比較嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)要求:

包括蛋白質(zhì)含量,細(xì)菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細(xì)菌內(nèi)毒素,支持細(xì)胞增殖檢查。一款來(lái)自澳洲的Ausbian®胎牛血清在市場(chǎng)上頗受歡迎。它具有精選內(nèi)毒素極低、產(chǎn)量充足的血清批次,滿(mǎn)足干細(xì)胞、基因敲除、原代培養(yǎng)、細(xì)胞典藏、長(zhǎng)期傳代等各類(lèi)細(xì)胞的培養(yǎng)要求;澳洲血源,完整的檢測(cè)報(bào)告及滅病毒服務(wù),為各類(lèi)臨床相關(guān)項(xiàng)目的申報(bào)提供完整支持等特點(diǎn)。


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