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細胞空泡化是怎么回事?該如何解決?

更新時間:2022-11-30  |  點擊率:1292

細胞空泡化也叫做細胞質(zhì)空泡化,是2019年公布的感染病學名詞。

具體表現(xiàn)為:變性細胞的胞質(zhì)、胞核內(nèi)出現(xiàn)大小不一的空泡(水泡),細胞呈蜂窩狀或網(wǎng)狀的現(xiàn)象。變性嚴重者,小水泡相互融合成大水泡,細胞核懸于中央,或被擠于一側(cè),細胞形體顯著腫大,胞質(zhì)空白,外形如氣球狀。

導(dǎo)致細胞質(zhì)空泡化的潛在因素

有一部分細胞質(zhì)空泡化可以是可逆的,這類型的空泡化一般存在于暴露在誘導(dǎo)劑的情況下。誘導(dǎo)劑引起細胞狀態(tài)的改變或者細胞周期停滯,表現(xiàn)為細胞質(zhì)空泡化。合理控制誘導(dǎo)劑使用范圍,在脫離誘導(dǎo)劑后,細胞通常會回復(fù)正常表型。

也有一部分細胞質(zhì)空泡化是不可逆的。這種情況下,一般會導(dǎo)致細胞死亡,許多外源化合物、細菌、病毒感染后均會出現(xiàn)不可逆的胞質(zhì)空泡化。

因此,導(dǎo)致細胞質(zhì)空泡化的常見因素,可以總結(jié)為以下幾點(如有更多觀點,歡迎評論區(qū)補充):

1藥物誘導(dǎo)

一些特定的誘導(dǎo)劑處理,是細胞質(zhì)空泡化的原因,一般是需要觀察細胞變化而對細胞進行的特殊處理。

2細胞老化

原代細胞培養(yǎng)的過程中有時會出現(xiàn)此類情況。一些細胞處于終末分化狀態(tài),不會再分裂,時間長了就會空泡化而死亡。

對于永生化的細胞系進行反復(fù)傳代,導(dǎo)致細胞嚴重老化,也會出現(xiàn)這一現(xiàn)象。

3滲透壓和pH值

在細胞培養(yǎng)過程中,如果培養(yǎng)基滲透壓或pH發(fā)生比較大的改變,或培養(yǎng)基的初始pH值與細胞正常所需pH值差別巨大,也容易使細胞生長收到刺激,發(fā)生空泡化。

4胰酶消化

胰酶消化時間過長,或是在吹打細胞時太過大力而產(chǎn)生太多氣泡,都容易導(dǎo)致細胞狀態(tài)受損,長期如此,可能引起細胞質(zhì)空泡化。

5細胞代謝

在細胞培養(yǎng)過程中,由于血清質(zhì)量差或是濃度過低等情況下,可能導(dǎo)致細胞代謝出現(xiàn)問題,如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激從而引起細胞質(zhì)空泡化的現(xiàn)象。

6細胞自噬

當細胞缺乏營養(yǎng)處于饑餓狀態(tài)時,也容易因細胞自噬而產(chǎn)生空泡,形成自噬小體,但是自噬小體僅能在電鏡下觀察到,光學顯微鏡下是觀察不到的。

7細胞污染

支原體污染:支原體污染的初期,細胞是沒有什么明顯癥狀的,而且也無法通過光學顯微鏡觀察到,只有在嚴重的時候會導(dǎo)致細胞狀態(tài)變差,出現(xiàn)細胞空泡化的現(xiàn)象,細胞膜上也會出現(xiàn)小黑點附著,以及培養(yǎng)基變色速度加快這類癥狀。

病毒污染:一些文獻上也有記錄,觀察到病毒污染也會導(dǎo)致細胞出現(xiàn)空泡化的情況。

細胞質(zhì)空泡化怎么辦?

由于導(dǎo)致細胞質(zhì)空泡的原因眾多,因此要仔細分析,尋找解決方案。

1)如果是因為細胞老化導(dǎo)致的,可以通過復(fù)蘇代數(shù)靠前的細胞進行培養(yǎng)來解決細胞空泡問題。

2)調(diào)整培養(yǎng)基至合適的pH,再進行培養(yǎng),來解決因pH差異大而導(dǎo)致的細胞空泡問題。

3)在傳代時,選擇科學的消化方法:合適的胰酶濃度、適當?shù)南袌?,在操作時避免吹打太過用力出現(xiàn)太多氣泡。

4)要保證細胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)充足,可以根據(jù)情況,適當增加血清濃度以及谷氨酰胺。

5)選擇質(zhì)量優(yōu)質(zhì)、渠道正規(guī)的胎牛血清,優(yōu)質(zhì)胎牛血清經(jīng)過嚴格的質(zhì)量檢測,外源物質(zhì)盡可能做到更低,減少對細胞的刺激;渠道正規(guī)的胎牛血清,全程冷鏈運輸,避免反復(fù)凍融而帶來的營養(yǎng)物質(zhì)的損耗,細胞生長更安心。

Ausbian進口特級胎牛血清, 精選內(nèi)毒素更低的批次(≤3EU/ml),微生物檢測結(jié)果均為未檢出,全程冷鏈運輸,避免反復(fù)凍融。

6)在細胞培養(yǎng)時要嚴格進行無菌操作,操作時要規(guī)范,減少污染的可能性。對于實驗環(huán)境與器械,可以用實驗環(huán)境專用的污染清除試劑:Mycoplasma-off™、Water Shield™,有效預(yù)防實驗環(huán)境中的支原體污染。


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