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細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生哪些影響?

更新時間:2023-10-22  |  點擊率:376
  細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)研究以及藥物研發(fā)等領(lǐng)域中常見的一項實驗技術(shù)。在細(xì)胞培養(yǎng)實驗中,細(xì)胞數(shù)量、培養(yǎng)基的配比、培養(yǎng)條件等因素會對實驗結(jié)果產(chǎn)生重要影響,但實驗人員通常忽略的一點是,細(xì)胞培養(yǎng)中還存在著一種微小的生物體——支原體,它會對實驗結(jié)果產(chǎn)生極大的干擾。
  

 

  支原體是一類非常小的細(xì)菌樣生物,屬于肺炎衣原體科,可以侵染人類和動物的眼部、呼吸道、生殖道等部位引發(fā)多種疾病,如沙眼、肺炎、尿道炎等。支原體感染癥主要以隱性感染為主,潛伏期較長,發(fā)現(xiàn)不易。支原體對溫度敏感,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,即使極低程度的污染也可能導(dǎo)致嚴(yán)重的影響。
  
  細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染,指的是在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞中混入了支原體,或細(xì)胞培養(yǎng)器皿、培養(yǎng)基、工具等中存在著支原體,從而破壞了細(xì)胞培養(yǎng)試驗系統(tǒng)的純度和穩(wěn)定性。支原體污染極其普遍,尤其在低級別人員、技術(shù)水平差、設(shè)備陳舊或不潔、操作規(guī)范不嚴(yán)等情況下,更容易發(fā)生。
  
  細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生重要影響。首先,支原體會占據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)試驗系統(tǒng)中的一部分營養(yǎng)成分,從而損害細(xì)胞的生長和發(fā)育。其次,由于支原體與真菌、細(xì)菌等雜質(zhì)的形態(tài)類似,很難進行區(qū)分,這使得細(xì)胞培養(yǎng)污染的檢測變得困難。此外,不同類型的支原體還會對細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成、代謝通路和信號傳遞等方面產(chǎn)生影響,從而導(dǎo)致細(xì)胞行為發(fā)生異常,引發(fā)一系列的實驗結(jié)果誤差。最嚴(yán)重的情況下,支原體污染可能導(dǎo)致實驗結(jié)果失真,并可能給人體健康帶來潛在的風(fēng)險和威脅。
  
  為了避免細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染,實驗室需要采取一些有效措施。首先,實驗人員應(yīng)該嚴(yán)格遵守操作規(guī)范,以確保細(xì)胞培養(yǎng)試驗系統(tǒng)的純度和穩(wěn)定性。其次,在進行細(xì)胞培養(yǎng)之前,應(yīng)對所有培養(yǎng)器皿、工具和培養(yǎng)基進行消毒處理。消毒處理可以采用高溫、紫外線或者化學(xué)消毒方法,以保證消除支原體等微生物的存在。此外,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,實驗人員還應(yīng)該不斷監(jiān)測培養(yǎng)過程中的污染情況,并及時采取相應(yīng)的措施。
  
  針對支原體的檢測方法包括PCR、ELISA、DTT/抗生素追加法等,其中PCR是常用的檢測方法,能夠高效地檢測出極低濃度的支原體。同時,實驗人員在進行細(xì)胞培養(yǎng)實驗的時候,也可以針對特定的支原體類型,使用一些抗生素等藥物來預(yù)防支原體的污染和擴散,但是這種方法需要注意抗生素的濃度和對試驗結(jié)果的影響。
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