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如何用胎牛血清配制細(xì)胞培養(yǎng)液?

更新時(shí)間:2023-10-29  |  點(diǎn)擊率:792

配制細(xì)胞培養(yǎng)基(Cell Culture Medium)時(shí),常使用胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)作為關(guān)鍵成分之一,因?yàn)樗胸S富的生長因子、蛋白質(zhì)和養(yǎng)分,對(duì)細(xì)胞的生長和繁殖非常有益。以下是配制細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)使用胎牛血清的一般步驟:

 

材料準(zhǔn)備:

 

適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基基礎(chǔ)(例如,DMEM,RPMI-1640MEM等)。

胎牛血清(FBS)。

雙抗溶液(選加)

步驟:

 

消毒操作: 在無菌工作臺(tái)下,確保所有用具和試劑都是無菌的,以防止細(xì)胞培養(yǎng)的污染。

 

血清選擇: 決定所需的FBS濃度。通常,FBS的最終濃度在培養(yǎng)基中約為5%10%。要注意,不同類型的細(xì)胞可能需要不同的FBS濃度。一些特殊細(xì)胞培養(yǎng)可能需要更低的FBS濃度。

 

配制培養(yǎng)基: 將血清用三步法解凍,根據(jù)您所選擇的基礎(chǔ)培養(yǎng)基的要求,將FBS添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。通常,將FBS添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基的體積比例為5%10%。

 

添加補(bǔ)充物: 根據(jù)您培養(yǎng)的細(xì)胞類型,可能需要添加額外的補(bǔ)充物,如非必要氨基酸、維生素、雙抗溶液等。確保按照相關(guān)實(shí)驗(yàn)室方案或文獻(xiàn)中的建議添加這些成分。

 

混勻: 使輕柔混勻,確保FBS和其他成分均勻分散在培養(yǎng)基中。

 

保存: 將培養(yǎng)基存儲(chǔ)在4°C的冰箱中,避免陽光直射,以延長其保存時(shí)間,盡量在1周內(nèi)用完。

 

請(qǐng)注意,不同類型的細(xì)胞可能需要不同的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件,因此在開始實(shí)驗(yàn)前,應(yīng)仔細(xì)了解您正在培養(yǎng)的特定細(xì)胞類型的培養(yǎng)需求,并根據(jù)需要進(jìn)行定制化的培養(yǎng)基配制。此外,細(xì)胞培養(yǎng)過程中的無菌操作非常重要,以防止細(xì)胞培養(yǎng)的污染。


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