細(xì)胞培養(yǎng)是研究細(xì)胞生物學(xué)的基礎(chǔ)，胎牛血清作為重要的細(xì)胞培養(yǎng)試劑，在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清，內(nèi)毒素含量低，適合各類細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖。

綠色熒光蛋白（GFP）是一種常用的用于觀察細(xì)胞內(nèi)部的具體活動(dòng)蛋白，將GFP序列搭載在能結(jié)合目標(biāo)分子的基因序列后，就能形成用于指示目標(biāo)存在狀態(tài)的報(bào)告基因。在細(xì)胞內(nèi)部中，報(bào)告基因與目的基因相連后，就能通過(guò)綠色熒光來(lái)顯示目標(biāo)產(chǎn)物的信號(hào)。

近日，科研人員開發(fā)了一種多路復(fù)用策略，該策略使用自組裝肽在活細(xì)胞中隨機(jī)但穩(wěn)定的點(diǎn)聚集現(xiàn)有的遺傳編碼動(dòng)態(tài)熒光報(bào)告，這種空間復(fù)用成像(SMI)策略可以測(cè)量存在于每個(gè)集群位置的蜂窩信號(hào)，具有比頻譜復(fù)用更大的復(fù)用容量。

然而，考慮到其報(bào)告身份編碼的空間性質(zhì)，SMI不能用于可視化活細(xì)胞或細(xì)胞器中蛋白質(zhì)的組織，也不能可視化響應(yīng)刺激的蛋白質(zhì)運(yùn)動(dòng)。SMI也不能容易地測(cè)量由存在的蛋白質(zhì)量所指示的變化，如細(xì)胞基因表達(dá)或局部蛋白質(zhì)翻譯。然而，利用空間作為一種資源來(lái)促進(jìn)smi成像——這是其他成像發(fā)展(如擴(kuò)展顯微鏡)中使用的主題——提出了一個(gè)問(wèn)題，即是否可以利用其他非常規(guī)資源(如時(shí)間)來(lái)增加活細(xì)胞中同時(shí)可觀察到的信號(hào)數(shù)量。

科研人員在此次研究中，通過(guò)使用具有不同時(shí)鐘特性的熒光團(tuán)，來(lái)指示不同的細(xì)胞信號(hào)，一個(gè)簡(jiǎn)短的視頻(在幾秒鐘的時(shí)間內(nèi)拍攝)記錄了每個(gè)像素處熒光的時(shí)間信息，可以使用標(biāo)準(zhǔn)解混線性代數(shù)進(jìn)行反轉(zhuǎn)，以產(chǎn)生該像素處的單個(gè)信號(hào)幅度。每個(gè)像素處的信號(hào)幅度僅僅是系數(shù)乘以每個(gè)熒光團(tuán)的標(biāo)準(zhǔn)時(shí)間波動(dòng)跡，當(dāng)以加權(quán)形式求和時(shí)，就構(gòu)成了在該像素處獲得的記錄跡。

科研人員在這里使用具有不同關(guān)閉速率的可逆光開關(guān)FPs (rrsfp)來(lái)實(shí)現(xiàn)時(shí)鐘效果，盡管原則上任何時(shí)間波動(dòng)的信號(hào)都可能適用于這一概念。研究表明，暫時(shí)復(fù)用成像(TMI)可以支持更多的信號(hào)一次成像比傳統(tǒng)的光譜復(fù)用可行的傳統(tǒng)顯微鏡上使用遺傳編碼試劑，揭示細(xì)胞周期蛋白之間的關(guān)系，以及不同的激酶活性之間的關(guān)系。TMI不需要任何硬件，除了標(biāo)準(zhǔn)的熒光顯微鏡，通常提供給生物學(xué)家，并使用遺傳編碼熒光報(bào)告，適合標(biāo)準(zhǔn)的生物學(xué)工作流程。