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逆轉(zhuǎn)錄病毒研究取得新研究,德國MB助力科研

更新時間:2024-01-31  |  點擊率:411

逆轉(zhuǎn)錄病毒的研究,除了細(xì)胞學(xué)研究,還需要大量的分子生物學(xué)研究,因此,對于實驗室的衛(wèi)生要救也更高。德國MB公司生產(chǎn)的PCR Clean

 

為了順利感染宿主細(xì)胞,逆轉(zhuǎn)錄病毒必須將其逆轉(zhuǎn)錄RNA基因組的DNA拷貝整合到宿主染色體中。因此,核膜(NE)是防止逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的屏障。大多數(shù)逆轉(zhuǎn)錄病毒依靠有絲分裂NE分解進(jìn)入細(xì)胞核,因此只感染增殖細(xì)胞。然而,慢病毒,如HIV-1,是例外的,因為它們感染具有完整NEs的非分裂細(xì)胞。在該過程中,通過核孔復(fù)合物(npc)是很重要的的步驟。

 

NPCs的質(zhì)量約為100 MDa,并為核細(xì)胞質(zhì)運輸提供通道由通透性屏障控制。核轉(zhuǎn)運受體(NTRs)能夠主動轉(zhuǎn)運,以便利的方式穿過NPCs,并在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)之間循環(huán)。進(jìn)口蛋白β超家族的成員代表了最大的NTR類。它們從rangtp系統(tǒng)中獲取能量,以rangtp控制的方式捆綁貨物,并將它們轉(zhuǎn)移到NPC的屏障上。NPC由大約30種不同的核孔蛋白(Nups)構(gòu)建,包括大約10種所謂的FG-Nups,它們將屏障形成的苯丙氨酸-甘氨酸(FG)重復(fù)結(jié)構(gòu)域錨定在NPC支架上。

 

FG結(jié)構(gòu)域具有較低的序列復(fù)雜性,本質(zhì)上是無序的,并且包含許多FG二肽基序,這些基序在易位過程中與NTRs結(jié)合。Nup98FG結(jié)構(gòu)域及其同源性的特殊之處在于它們出現(xiàn)在非常高的拷貝數(shù)中,并且在每個NPC中貢獻(xiàn)了最多的FG質(zhì)量。它們具有最高的FG基序計數(shù)(50)和密度(約每12個殘基中有一個)。水是這些FG結(jié)構(gòu)域的不良溶劑;因此,它們很容易從稀水溶液中相分離,形成蛋白質(zhì)密度很高(400mg ml?1)FG相。由此產(chǎn)生的內(nèi)聚FG相非常好地再現(xiàn)了核轉(zhuǎn)運選擇性,排除了惰性分子,如GFPmCherry,同時允許具有非常高分配系數(shù)的NTR及其貨物復(fù)合物進(jìn)入。此外,流動物種在黏合FG相中的分配系數(shù)是其NPC通過率的一個很好的預(yù)測指標(biāo),這兩個參數(shù)在四個數(shù)量級范圍內(nèi)具有良好的相關(guān)性。因此,這種體外重建的FG相為研究NPC屏障的性質(zhì)及其與NTRs的相互作用提供了方便的方法。

 

HIV-1感染需要病毒基因組的核進(jìn)入。先前的證據(jù)表明,這種進(jìn)入通過核孔復(fù)合物(NPC)進(jìn)行,120 × 60 nm的衣殼通過約60 nm寬的中央通道擠壓1并穿過NPC的滲透性屏障。這種屏障可以被描述為FG相,它由粘合相互作用的苯丙氨酸-甘氨酸(FG)重復(fù)體組裝而成,并選擇性地滲透到核轉(zhuǎn)運受體(NTRs)捕獲的貨物中。

 

近日,科研人員發(fā)現(xiàn)HIV-1衣殼組裝可以以一種與ntr無關(guān)的方式有效地靶向npc,并直接結(jié)合幾種類型的FG重復(fù)序列,包括屏障形成的內(nèi)聚重復(fù)序列。像NTRs一樣,衣殼很容易分裂成體外組裝的內(nèi)聚FG相,可以作為NPC模擬物,不包括更小的惰性探針,如mCherry。事實上,衣殼組裝極大地增強了衣殼蛋白進(jìn)入FG相的能力,這也允許被封裝的客戶端進(jìn)入。因此,數(shù)據(jù)表明HIV-1衣殼的行為類似于NTR,其內(nèi)部充當(dāng)貨物集裝箱。由于用反式NTRs涂覆衣殼會使直徑增加10納米或更多,科研人員認(rèn)為這種自易位"衣殼破壞了NPC支架施加的尺寸限制,從而繞過了病毒感染的有效屏障。


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